病理学技术是病理学诊断的基础，其发展引领着病理诊断学的进步。最初的诊断主要依赖于形态学、组织学和生化层面进行分析。病理学作为研究疾病发生和发展规律的学科，主要关注疾病过程中组织和细胞的代谢、功能及结构变化。

在染色实验中，组织处理的各个环节对于最终染色结果至关重要，包括取材、固定、脱水、透明、浸润、包埋、切片和染色等步骤。

组织取材与固定

1. **取材要求**：应选用新鲜且大小适中的组织块，避免挤压变形，尽量保持组织的原有形态和清洁。理想的组织块尺寸为不超过2×15×0.3 cm。

2. **固定重要性**：固定是关键步骤，通常采用10%甲醛溶液或其他固定液（如Carnoy固定液），固定时间依据组织块大小确定，通常不超过24小时，以防止组织自溶或腐败。

3. **固定液选择**：固定液的选择会直接影响后续的染色效果，例如Bouin's固定液适用于额外提高染色效果的组织。

组织固定的目的

1. **防止自溶**：组织离体后，失去氧气供应，细胞会释放溶酶体酶导致组织自溶。因此，固定的首要目的是迅速杀死细胞并固定膜结构，防止自溶现象。

2. **抑制细菌生长**：组织离体后，若未及时固定，容易成为细菌滋生的培养基，因此需快速固定以防止腐败。

3. **保持细胞结构**：保持活细胞时的微细结构及核的有丝分裂形态等，均需通过固定实现。

4. **沉淀细胞内成分**：固定过程中尽量保持细胞内各类物质的不溶性，以便在染色后显现其存在。

5. **提高组织的物理特性**：确保在随后脱水、透明、浸蜡的过程中，组织不发生明显扭曲和变形。

6. **区分细胞折光率**：固定过程使不同细胞或细胞内物质产生不同折光率，从而在染色后便于识别细胞结构。

7. **促进染色**：如使用Bouin's固定液可以使结缔组织染色更加鲜艳。

8. **保存抗原性**：细胞内的抗原保持完整，有助于免疫组化检测中抗原与抗体结合反应。

固定过程中的注意事项

1. **及时固定**：组织离体后，需在1小时内立即固定。

2. **选择适当的固定液**：需根据实验要求选择合适的固定液。

3. **固定液用量**：固定液体积需大于组织体积的4-10倍。

4. **控制固定液浓度**：固定液浓度需准确，过稀或过浓均会影响固定效果。

5. **固定温度**：固定应在室温或35-37℃下进行，温度过高可能导致组织自溶或细胞抗原损坏。

6. **固定时间**：新鲜标本应剖开后固定12-24小时，固定时间应不超过48小时，同时对于某些分子病理标本，固定时间应控制在6-24小时内。

Bouin's固定液的应用

利来国际推荐的Bouin's固定液（产品编号：BL-G016），主要成分包括PA、甲醛和乙酸，广泛用于细胞和组织的固定，以便后续的染色、观察和分析。Bouin's固定液特别适合于免疫组化、病理学和胚胎学研究。此外，它在一些特殊实验中发挥重要作用，如观察鸡法氏囊的显微结构等。利来国际的Bouin's固定液也常用于整体染色法，以提高实验效率，节省人力与物力。