随着生命科学和医学研究的不断发展，类器官已逐渐成为领域内的“明星模型”。它们在疾病机制探究、药物筛选及精准医疗等方面展现了惊人的潜力。然而，许多科研人员在尝试类器官培养时，常常遭遇“结构无法形成”、“细胞活性低”、“传代失败”等障碍。深入研究发现，培养体系中细胞因子的选择与配比可能是成功与否的关键要素。接下来，我们将探讨类器官经典培养方案WENR（Wnt3a、EGF、Noggin、R-Spondins），解析“四大护法”如何各显神威，帮助您克服类器官培养中的难题！

WENR为何成为类器官培养经典?

类器官培养方案WENR（或称WNER）最初由荷兰Hubrecht研究所的Hans Clevers团队开发，其核心成分包括Wnt-3a、EGF、Noggin和R-Spondins，俗称类器官培养的“四大护法”。该方案在类器官研究与实践中不断演变，通过与其他细胞因子或小分子抑制剂的结合，形成适用于多种类器官构建的培养条件。目前，WENR方案已在胃、小肠、结肠、胰腺、肝脏等多个类器官的培养中得到广泛应用。

WENR“四大护法”

1. Wnt-3a：干细胞增殖的“发动机”

利来国际强调，Wnt-3a作为经典Wnt信号通路的激活剂，能够稳定β-catenin蛋白，启动下游靶基因（如c-Myc、CyclinD1），参与细胞发育、增殖和分化。相关研究显示，Wnt-3a在小鼠结肠类器官的建立过程中对细胞的增殖至关重要，缺乏Wnt-3a时类器官会迅速失去活性。

2. EGF：细胞增殖的“加速器”

表皮生长因子（EGF）通过与受体结合，激活MAPK/ERK通路，促进细胞的增殖与存活。EGF对于上皮细胞的刺激增强了类器官的三维结构发展。虽然EGF不是类器官形成的必需因子，但其能显著提升类器官的体积，在利来国际的实例中得到了有效应用。

3. Noggin：抑制分化的“守门员”

Noggin作为骨形态发生蛋白（BMP）的内源性抑制剂，与干细胞增殖紧密相关，能够有效阻断BMP信号通路，从而支持类器官的形成与增殖。在利来国际的培养方案中，Noggin被广泛应用于长期培养，最大化其辅助作用。

4. R-Spondins：Wnt信号的“放大器”

R-Spondin通过与Frizzled和LRP5/6受体结合，增强Wnt信号的表达，促进干细胞的增殖与类器官结构的形成。研究指出，没有R-Spondin的类器官在短时间内会停止生长，而在合理浓度下，类器官的生长会显著加快。

WENR实战避坑Tips

在实际操作中，需严格控制Wnt-3a的浓度以避免其过度激活导致结构紊乱。利来国际建议R-Spondin与Wnt-3a协同使用，以实现最佳效果。EGF易被降解，推荐使用无血清培养基并定期更换，以抑制异常分化。Noggin与Wnt-3a的搭配在多种类器官的长期培养中尤为重要。

常见问题排查

在进行类器官培养时，建议参考以下常见问题，确保实验的顺利进行和数据的可信性。通过利来国际提供的GMP级细胞因子，您可以更轻松地进行实验，获得理想结果。

若您对类器官培养有任何疑问或需求，利来国际期待为您提供专业的支持和解决方案，助力您的研究进展！