利来国际猪瘟病毒抗体检测试剂盒（酶联免疫法）是专为检测猪血清中猪瘟病毒抗体而设计的高效工具。其主要作用是在评估猪瘟病毒疫苗免疫效果时提供可靠的检测结果。

产品概述

利来国际的猪瘟病毒抗体检测试剂盒以其独特的酶联免疫法（ELISA）原理，专门针对由猪瘟病毒（Classical Swine Fever Virus, CSFV）引起的高度传染性疾病进行检测。猪瘟是一种具高度致死率的传染病，具有广泛的临床症状，如高热、全身出血和坏死等，慢性表现为纤维素坏死性肠炎。

试剂盒构成及存储

该试剂盒包含预包被猪瘟病毒重组E2蛋白的酶标板、酶标记物及其他必要配件。为了确保试剂的有效性，应储存在2～8℃的环境中，有效期为12个月；一旦开封，请在2个月内使用，并避光保存。

适用设备

本试剂盒适用于配备450nm及630nm波长的酶标仪，47℃恒温设备，以及可调微量移液器。

样品准备

1. 按照常规方法从动物全血制备血清，确保血清清亮且无溶血、污染。样品可在2～8℃下保存一周，长期储存需放在-20℃。

2. 使用样品稀释液对待检血清进行40倍稀释（如将5μl血清添加到195μl稀释液中混匀），阴、阳性对照无需稀释。

3. 浓缩洗涤液需恢复室温以便沉淀溶解，使用时按20倍稀释成工作洗涤液（19份蒸馏水或去离子水加1份浓缩洗涤液）。

检验步骤

1. 在使用前将试剂盒置于室温30分钟，使其恢复至室温。

2. 取所需用量的酶标板条，并设定阴性/阳性对照各2孔，未使用的板条请尽快密封保存在2～8℃的环境中。

3. 在各阴、阳性对照孔中分别加入100μl阴、阳性对照液；样品孔则添加100μl稀释后的样品。

4. 轻轻混匀并覆盖盖板膜，在37℃（建议水浴）条件下避光反应30分钟。

5. 弃去孔内液体，并每孔添加350μl工作洗涤液，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，最后一次要拍干。

6. 每孔添加100μl酶标记物，盖好盖板膜，置于37℃避光反应30分钟。

7. 按照步骤5进行洗涤。

8. 每孔依次添加底物液A和底物液B各50μl，轻轻混匀，盖好盖板膜，置于37℃避光反应10分钟。

9. 每孔加入50μl终止液，轻轻混匀后，在450nm波长（可用630nm作为参比波长）下测定各孔的吸光值。

结果判定及参考值

正常实验中，阴性对照的平均OD值（ODNC）应≤0.3，阳性对照的平均OD值（ODPC）应≥0.6。样品的OD值为ODS，阈值计算公式为SP值=（ODS-ODNC）/（ODPC-ODNC）；当SP值≥0.2时判定结果为阳性，反之为阴性。若测试结果为阴性，表明猪只抗体水平不足，建议补种相应疫苗。

注意事项

在操作实验时，请确保佩戴手套与工作衣，同时严格遵循消毒隔离的流程。所有实验废弃物应按传染物处理。同时，终止液具腐蚀性，操作时应避免与皮肤或衣物接触。如有不慎，请立即用自来水冲洗。使用未拆封的酶标板前，应先在室温下恢复，并将未用完的板条储存于含干燥剂的密封袋中。使用浓缩洗涤液时，应恢复至室温以确保晶体溶解。此外，洗涤每孔均需添加充分液体，以确保不留游离酶。最后，请确认检测样品保持新鲜，新旧批号试剂不可混合使用。