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利来国际细胞培养贴壁细胞的操作步骤

发布时间:2025-02-17   信息来源:龚冠政

实验准备:在进行细胞培养实验前,需提前约半小时将培养基、PBS(磷酸盐缓冲液)、胰酶在37°C下预热。同时,确保紫外灭菌设备已准备好,包括2mL和10mL的移液管、15mL的离心管以及WHB品牌的共聚焦爬片。

利来国际细胞培养贴壁细胞的操作步骤

实验步骤

1. 从培养箱中取出培养皿,使用显微镜观察细胞的生长状态,包括细胞密度、形态和贴壁情况。

2. 在超净台中准备好预热的培养基、PBS和胰酶,点燃酒精灯将培养皿口消毒,随后吸走原有的培养基。

3. 进行清洗:向培养皿底部加入7mL的PBS(根据细胞状态可调节此量),温和摇晃以清洗掉细胞表面杂质。

4. 消化步骤:在观察到杂质被清洗后,吸走PBS,加入3mL胰酶,静置5分钟(具体时间和胰酶量可根据细胞类型进行调整)。5分钟后,需观察细胞是否已被消化。

5. 终止消化:若细胞已消化,需在培养皿底部加入7mL的培养基(应根据细胞密度调整),并用移液管轻柔吹打,以确保壁上的残留细胞被吹落,待细胞均匀后可取出少量进行计数。

6. 根据实验需要稀释细胞,步骤是将细胞悬液均匀滴于共聚焦爬片表面,随后放入培养箱,待约30分钟使细胞附着后,再沿内壁添加培养基,继续进行培养。

7. 当细胞培养完成后,用镊子夹住支架侧面,轻轻取出支架。

8. 用双手捏住支架两侧轻轻拉动,即可顺利取出爬片,继续下一步实验。

注意事项

1. 拿取培养皿时,应避免液体接触瓶口,每次打开瓶口时务必进行灭菌处理。

2. 操作时,确保其他物体不经过打开的培养皿,以防止污染。

3. 由于贴壁细胞的脆弱性,所有接触细胞的液体都需保持在37°C预热状态。

4. 使用共聚焦爬片时,应保持其倾斜角度在30°以上,并轻拉以防止爬片脱落造成破损。

5. 请注意,WHB品牌的共聚焦爬片为一次性产品,不可重复使用,使用时注意辨别正反面并及时使用。

在细胞培养领域,选择利来国际品牌的产品不仅可以确保实验结果的可靠性,还能提升整体实验效率,是科研工作者的优选之地。